两虫即贾第鞭毛虫和隐孢子虫，它们广泛存在于自然环境中，可通过饮用水、娱乐用水等途径传播，对人体健康造成严重威胁。因此，对两虫进行检测至关重要。下面为你详细介绍两虫检测的测试方法。

一、检测意义

贾第鞭毛虫和隐孢子虫是两种常见的水源性致病原生动物。贾第鞭毛虫可引起贾第虫病，主要症状包括腹泻、腹痛、腹胀、恶心、呕吐等；隐孢子虫可引起隐孢子虫病，症状主要为腹泻，尤其在免疫力低下的人群中，如儿童、老年人、艾滋病患者等，病情可能更为严重，甚至危及生命。对两虫进行检测，可以及时掌握水源中两虫的污染情况，为保障饮用水安全和公共卫生提供重要依据。

二、检测方法概述

目前，两虫检测主要采用的方法有免疫磁分离荧光抗体法（IMS-FCM）、滤膜浓缩/密度梯度分离荧光抗体法、巢式 PCR 法等。其中，免疫磁分离荧光抗体法是较为常用的检测方法。

三、免疫磁分离荧光抗体法（IMS-FCM）步骤详解

1. 样品采集

（1）采集水样时，应根据检测目的和要求确定采样点和采样量。一般来说，对于饮用水源，可在取水口、蓄水池等位置采集水样；对于污水处理厂出水，可在排放口采集水样。

（2）采样容器应选择干净、无污染的塑料瓶或玻璃瓶，并在采样前进行严格的清洗和消毒。

（3）采样时，应避免样品受到污染，如避免手接触采样容器内壁、避免在有污染源的地方采样等。

2. 样品过滤

（1）将采集的水样通过孔径为 1μm 左右的滤膜进行过滤，以去除水中的杂质和较大颗粒物质。

（2）过滤过程中，应保持过滤速度适中，避免过快或过慢，以免影响过滤效果。

（3）过滤完成后，将滤膜小心地从过滤装置上取下，放入干净的培养皿中备用。

3. 免疫磁分离

（1）将过滤后的滤膜放入含有贾第鞭毛虫和隐孢子虫特异性抗体的免疫磁珠溶液中，轻轻搅拌，使免疫磁珠与两虫结合。

（2）将含有免疫磁珠和两虫的混合溶液置于磁场中，使免疫磁珠被吸附在磁场一侧，而未结合两虫的杂质则被去除。

（3）将吸附有免疫磁珠和两虫的磁场一侧溶液取出，放入干净的试管中备用。

4. 荧光抗体染色

（1）向含有免疫磁珠和两虫的试管中加入贾第鞭毛虫和隐孢子虫特异性荧光抗体，轻轻搅拌，使荧光抗体与两虫结合。

（2）在暗处放置一段时间，让荧光抗体与两虫充分反应。

（3）反应完成后，用缓冲液冲洗试管，去除未结合的荧光抗体。

5. 流式细胞仪检测

（1）将染色后的样品溶液注入流式细胞仪中，通过激光照射激发荧光抗体发出荧光。

（2）流式细胞仪根据荧光信号的强度和特征，对样品中的两虫进行检测和计数。

（3）根据检测结果，计算出样品中两虫的浓度。

四、质量控制

1. 采样过程的质量控制

（1）采样人员应经过专业培训，熟悉采样方法和操作规范。

（2）采样时应严格遵守无菌操作原则，避免样品受到污染。

（3）采样后应及时对样品进行标记和记录，包括采样时间、地点、采样量、采样人员等信息。

2. 检测过程的质量控制

（1）检测所用的试剂和材料应符合质量标准，且在有效期内使用。

（2）检测仪器应定期进行校准和维护，确保检测结果的准确性和可靠性。

（3）检测过程中应设置空白对照和阳性对照，以验证检测方法的有效性和准确性。

（4）检测人员应严格按照检测方法的操作规范进行操作，避免人为误差。

五、结果解读与报告

1. 结果解读

根据流式细胞仪检测结果，判断样品中是否存在贾第鞭毛虫和隐孢子虫。如果检测结果为阳性，则说明样品中含有两虫；如果检测结果为阴性，则说明样品中未检测到两虫。同时，根据检测结果计算出两虫的浓度，以评估水源中两虫的污染程度。

2. 报告内容

检测报告应包括以下内容：

（1）检测项目名称、检测方法、检测依据等。

（2）样品信息，包括样品名称、采样时间、地点、采样量等。

（3）检测结果，包括两虫的检测结果（阳性或阴性）、浓度等。

（4）质量控制信息，包括空白对照和阳性对照的检测结果等。

（5）检测人员签名、审核人员签名、报告日期等。

总之，两虫检测是保障饮用水安全和公共卫生的重要手段。通过采用免疫磁分离荧光抗体法等检测方法，可以准确、快速地检测出水源中的贾第鞭毛虫和隐孢子虫，为采取相应的防治措施提供科学依据。在检测过程中，应严格遵守操作规范，加强质量控制，确保检测结果的准确性和可靠性。