说明
1、首先要进行标准接种:
吸取2ml吐温-20稀释液(0.001%) 加入标样管中,涡旋混匀后倒入乘有约1-2L纯水的广口瓶中,(标样共接种于10L水中,剩余水应在抽滤过程中分3次倒入)向标样管中加入3ml纯水,涡旋洗涤(并将标样管倒置,使管帽也被充分洗涤),将洗涤后标样管中的液体,倒入广口瓶中,重复5次。将广口瓶放置在磁力搅拌器上,并向其中投入磁力搅拌子。链接蠕动泵及过滤装置,开始过滤,流速控制在1-2L/min。(清洗容器应使用纯水,不要使用清洁剂)
2、样品的淘洗和浓缩
2.1、准备缓冲液在开始混合缓冲液前,首先确定有多少样品进行淘洗,根据样品量配制缓冲液。需要准备400ml纯水用于淘洗设备的预冲洗,每个样品至少需要400ml缓冲液。配置1升淘洗液:在容器中加入8g NaCl,0.2g KCl,2.9g Na2HPO4以及0.2g KH2PO4溶在0.9L的试剂级纯水中。调PH值到7.4。加0.1m1吐温-20溶液到容器中再搅拌10分钟。(注意:吐温-20溶液非常粘,应该用吸液管小心移出)
2.2、转移到缓冲液瓶中缓冲液瓶,包括一个10L 瓶子和一个4L的瓶子,建议10L瓶子放淘洗液,4L瓶子用来盛放纯水。
2.3、初始化的系统检测在样品淘洗前用纯水代替缓冲液进行操作,用于检测设备系统可否正常使用,并可对系统内部的管路进行冲洗。
a.将一个未使用过的滤芯放入滤器中(这个滤芯如果只作为初始化系统检测及清洗管路时使用,可重复使用一个月)
b.完成样品淘洗过程的1-8步。
c.在淘洗结束后将离心管里的液体倒掉。
d.把滤器从淘洗设备中取下,然后把出口分流调节装置从滤器上取下。
e. 用70%的酒精擦洗QC干体。
f.进行正式的样品淘洗。
2.4、淘洗样品
a.打开两虫淘洗设备的开关(开:电源开关-空气压力阀,关:空气压力阀一一电源开关)打开空气压力泵。绿色的灯(显示电源)和红色的灯(显示设备处于准备状态)会亮。
b.把500ml锥形离心管的盖子打开,并把它放到淘洗设备里的离心管支架上。
c.把分流调节装置连接到滤器上的QF干体装置上。
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