由于两虫对人类健康造成极大损害,因此如何快速、便捷检测两虫成为各国研究目标。由于当前国标方法源自EPA 1623,因此相关检测设备依赖进口仪器,同时检测耗材昂贵,单次耗材成本超过3000元,检测周期近2-3天,是制约国内检测两虫能力发展的重要因素。由中国科学院生态环境研究中心研发基于“滤膜浓缩/密度梯度分离荧光抗体法”的两虫检测技术,不仅成功打破国外技术垄断,达到国际先进水平,同时也使检测成本降低超过80%。其采用的自动化技术不仅缩短了样品处理时间,使用的AI技术也大幅提高识别率,降低了人员工作强度。
两虫检测系统生活饮用水出厂水的检测:水样采集与保存水样采集后应立即过滤,如果不能及时处理,可在0°C~4C条件下保存,但应在4天之内完成富集处理。
水样采集量:出厂水,100 L。样品浓缩操作步骤连接蠕动泵和不锈钢过滤器;取混合醋酸纤维膜(直径142 mm,孔径1 um~3 um)放于过滤器上,正面朝上,用纯水或PBS淋洗,安装过滤器,打开蠕动泵开始过滤水样,水样流速为0.3 L/min ~2 L/min;若样品浊度高,则需更换一次滤膜,更换时先停泵打开抽滤泵卸压,再打开过滤器换膜; 换下的膜存放于50mL离心管中,放- -张新膜(淋湿后)于过滤器上;水样过滤后,依次用200 mL ~300 mL PBST、200 mL ~300 mL纯水清洗容器内壁,并完全过滤清洗液;放低过滤器位置,确保抽吸管中所有水样被抽吸干净;
停泵打开抽滤泵卸压,取出膜存放于同一50 mL离心管中;离心管内添加45mL丙酮并晃动直至滤膜完全溶解;20°C、2000xG 条件下用摆动式离心机离心10 min (注意降速为0);离心结束后,取一滴上清液于水中,如有白色絮状沉淀形成,吸掉_上层离心液(吸取上清液时要缓慢,避免搅动沉淀),留沉淀7 mL~10 mL,再次添加丙酮至45 mL,20C、 2000xG 条件下离心10min,重复该步骤直至无白色絮状沉淀,吸掉上层离心液,进行下一步(丙酮溶解次数- -般需 3次~5次);向离心管中添加10 mL乙醇,轻轻混匀,再缓慢加入少量PBS溶液,直至终体积为45 mL, 20°C。2000xG条件下离心20min,离心完成后去掉上清液,留沉淀7mL~10mL。
我公司利用EPA1623方法对“两虫”(隐孢子虫和贾第鞭毛虫)检测有多年的研究经验,并长期在中国大陆地区总经销美国EPA1623方法和国标方法推荐的PALL公司用于监测的必备设备和耗材。目前,北京、天津、上海、成都、广州、深圳、佛山等水司都应用了我公司代理的“两虫检测试剂和设备,为保障“两虫”实验工作的顺利开展,我公司愿利用我们坚实的技术的实力,为水司在该领域提供优质、良好的技术培训和售后服务。
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