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Colitag™ 总大肠菌群大肠埃希氏菌耐热大肠菌群(粪大肠菌群)检测系统

2024-10-28
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··  ColitagTM简介  ··



Colitag™试剂在全球广泛的被使用在检测水中总大肠菌群、大肠埃希氏菌及耐热大肠菌群(粪大肠菌群)。该方法是美国EPA认可的标准快速检测方法(National Primary Drinking Water Regulations at 40 CFR Part 141.);也是中国国家标准中规定的酶底物法《生活饮用水标准检验方法》(GB/T5750.12-2006)。

Colitag™方法提供了一个名为"酸复苏"的新专利技术,能提高测试的灵敏度。这种尖端技术是利用酸性条件连同专门的养分,以恢复衰弱和受伤的总大肠菌群、大肠埃希氏菌,提高细菌的活性,降低假阴性。

此外,Colitag™利用其另一项专利技术,以自我调节水样的pH值至中性水平,并使得水样显现的颜色和荧光达到最佳的可视化效果。


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·· ColitagTM的检测原理 ··


Colitag™的主要成分是ONPG&MUG选择性培养基。试剂加入含有总大肠菌群细菌的水样,目标细菌在培养基中繁殖,大肠菌群细菌产生的特异性生物酶β-半乳糖苷酶能分解培养基中的底物ONPG,使培养基呈现黄色反应;粪大肠菌群在44.5°C培养时会分解培养基中的底物ONPG,使培养基呈现黄色反应。


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同时,若水样中含有大肠埃希氏菌,大肠埃希氏菌产生的特异性β-葡萄糖醛酸酶会分解培养基中的荧光底物MUG,从而产生特征性荧光。而绝大多数非大肠杆菌属菌类没有这两种酶,从而没有颜色反应。极少数能产生这种酶的非大肠菌群菌类也会被Colitag™的特殊配方选择性抑制。



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目前,美国EPA已经认可了十余种用于检测大肠菌群和大肠埃希氏菌的方法,其中Colitag™是EPA给出的检测数据最好的一种。Colitag™对大肠菌群和大肠埃希氏菌的假阴性为0%,对大肠菌群和大肠埃希氏菌的假阳性小干5%,远优于市场其他同类产品。

(参考:Federal Register Page 10538,  Vol.67 N0.45)








··Colitag™的检测步骤··




Colitag™定性检测(不需要定量盘)

1. 在100ml水样中加入Colitag试剂,摇匀,在36+/-1℃培养24小时。

2. 判读结果:

无色=阴性

黄色=总大肠菌群阳性

黄色+荧光=大肠埃希氏菌阳性

注意:粪大肠菌群需要在44.5℃培养24小时后进行观察,若显示黄色,即粪大肠菌群为阳性。

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Colitag™定量检测

 1. 使用iMPNPlate定量盘

(1)混合  将Colitag™加入到含有100ml水样的取样瓶   中,拧紧盖子后摇晃至取样瓶中试剂完全溶解。

(2)填充  将取样瓶中混合后的样品加入iMPNPlate定量盘中,确保10ml、1mL、0.1ml井内填充满样品。

(3)密封  使用配套的密封膜密封定量盘,密封完整后,确认井内的样品不会流动至其他井内。

(4)培养  将密封好的定量盘放置在培养箱中,如若检测总大肠菌群,需要在36±1℃培养24h;如若检测耐热大肠菌群(粪大肠菌群),需要在44 5℃培养24h。

(5)计数 培养24小时后分别记录10ml、1mL、01ml井颜色变黄的个数并查阅MPN表格得出结果即可。

(6)大肠埃希氏菌  需要在365nm紫外灯下照射变黄的试剂井,若出现蓝色荧光则为大肠埃希氏菌为阳性。

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 使用51或97孔定量盘

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